碘：
適用于不飽和或者芳香族化合物
配制方法：在100ml廣口瓶中，放入一張濾紙，少許碘粒。 或者在瓶中，加入10g碘粒，30g硅膠
高錳酸鉀
適用于含還原性基團化合物，比如羥基，氨基，醛
配制方法 ：1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3個月
磷鉬酸(PMA)
廣譜
配制方法 ：10 g of 磷鉬酸+100 mL 乙醇
紫外燈
適用于含共軛基團的化合物，芳香化合物
硫酸鈰
生物堿
配制方法：10%硫酸鈰(IV)+15%硫酸的水溶液
氯化鐵
苯酚類化合物
配制方法：1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.
桑色素(羥基黃酮)
廣譜, 有熒光活性
配制方法：0.1% 桑色素+甲醇
茚三酮
適用于氨基酸
配制方法：1.5g 茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸
二硝基苯肼(DNP)
適用于醛和酮
配制方法：12g二硝基苯肼+ 60mL 濃硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇
香草醛(香蘭素)
廣譜
配制方法：15g 香草醛 + 250mL 乙醇 +2.5mL 濃硫酸
溴甲酚綠
適用于羧酸，pKa<=5.0
配制方法 ：在100ml乙醇中，加入0.04g溴甲酚綠，緩慢滴加0.1M的NaOH水溶液，剛好出現藍色即至。
鉬酸鈰
廣譜
配制方法：235 mL 水 + 12 g 鉬酸氨 + 0.5 g 鉬酸鈰氨 + 15 mL 濃硫酸
茴香醛(對甲氧基苯甲醛)1
廣譜
配制方法：135 乙醇 + 5 mL 濃硫酸 + 1.5 mL of 冰醋酸 + 3.7 mL 茴香醛，劇烈攪拌，使混合均勻.
茴香醛(對甲氧基苯甲醛)2
適用于萜烯，桉樹腦(cineoles), withanolides, 出油柑堿(acronycine)
配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)
胺類物質常用的是：
（1）磷鉬酸顯色劑：磷鉬酸 5%-10% 乙醇溶液，淡黃色，久置變為淺綠色，不影響使用。浸板或噴板，加熱，淺黃色背景，還原性物質顯藍綠色斑點，如果斑點太濃，可能顯深黃色。
（2）CAM顯色劑:鉬酸銨9.6g,硫酸鈰0.4g,10%硫酸水溶液 200ml,混勻，極淡的黃色溶液，棕色瓶密閉保存，噴板，加熱，白色背景，還原性物質顯深藍色斑點。
顯色的方法各種各樣，主要根據化合物的性質選擇不同的顯色方法。許多關于植物有效成分提取與分離的書上都有介紹，通用的有碘、硫酸乙醇、香草醛－硫酸等，當然還有許多專用的顯色劑，如：溴甲酚綠使有機酸顯黃色，三氯化鐵使酚羥基顯藍色，碘化鉍鉀使生物堿顯桔黃色.....
顯色劑化合物
苯胺鄰苯二甲酸酯 碳水化合物，糖類
溴甲酚綠羧酸
二甲氨基苯甲醛 氨基酸，多肽
磷鉬酸苯酚類
羅丹明 類酯類
薄層層析常用顯色劑配制及顯色方法
附錄
附錄1 薄層層析及紙層析常用顯色劑配制及顯色方法
通用試劑
(1) 重絡酸鉀-硫酸:檢查一般有機物.
噴灑劑:5克重絡酸鉀溶于100毫升40%硫酸中.
薄層檢查:噴灑后加熱到150℃至班點出現
(2) 熒光素-溴:檢查不飽和化合物
噴灑劑:0.1克熒光素溶于100毫升乙醇中
溴試劑:5%的溴的四氯化碳溶液
噴灑后處理:噴灑熒光素溶液后,放置存有溴溶液的缸內,可于紫外線分析燈下檢查熒光,熒光素與溴化和成曙紅(Eosin)(無螢光),而不飽和化合物則成溴加成物,保留了原有熒光;若點樣較多,則呈黃色斑點,底板呈紅色.
(3) 碘:檢查一般有機物.
方法:a 層析譜放密閉缸內或瓷盤內，缸內預先放有碘結晶少許，大部分有機化合物呈棕色斑點。
B 層析譜放碘蒸氣中5分鐘（或噴5％碘的氯仿溶液）取出置空氣中待過量的碘蒸氣全部揮發后，噴1％淀粉的水溶液，斑點轉成藍色。
（4）硫酸：通用
噴灑劑：5％的濃硫酸乙醇溶液，或15％濃硫酸正丁醇溶液，或濃硫酸－醋酸（1：1）
噴灑后處理：空氣中干燥15分鐘，再熱至110℃直至出現顏色或熒光。
（5）硝酸銀－氫氧化銨（Tollen-Zaffaroni）試劑：檢查還原性物質。
溶液I : 0.1%N硝酸銀; 溶液II: 5N氫氧化銨
噴灑劑: I和II以1:5混合(臨用前混合)
噴灑后處理: 105℃加熱5~10分鐘,至深黑色斑點出現.
(6)磷鉬酸或磷鎢酸,硅鎢酸:檢查還原性物質,類脂體,生物堿,甾體
噴灑劑: 5~10%磷鉬酸或磷鎢酸或硅鎢酸乙醇溶液
噴灑后處理: 120℃加熱至斑點出現.
沉淀試劑: 1克硅鎢酸溶于20毫升水中,加10%鹽酸至強堿性.
生物堿
(7)硫酸??=硫酸:檢查生物堿及含碘化合物
噴灑劑: 0.1克硫酸?混懸于4毫升水中,加入1克三氯醋酸,加熱至沸,逐滴加入濃硫酸至澄清.
噴灑后處理: 110℃加熱數分鐘至斑點出現.
(8)碘化鉍鉀(Dragendorff)試劑:檢查生物堿及其他含氟化合物.
溶液I: 0.85克次硝酸鉍溶于10毫升冰醋酸40毫升水中
溶劑II: 8克碘化鉀溶于20毫升水中.
制備液I+II,等體積混合.可用于棕色瓶中保存較長時間,一般制備液可作沉淀試劑用.
噴灑液: 制備液1毫升與2毫升醋酸,10毫升水混合即得
(9).碘化汞鉀(Mayer)試劑: 檢查生物堿.
制備液: 13.55克氯化汞和49.8克碘化鉀各溶于20毫升水中,等體積混合并用水稀釋至1000毫升.
噴灑液: 制備液加1/10體積的17%鹽酸.
噴灑后處理: 觀察斑點,并于紫外線熒光分析燈下檢出.
(10) ?酸納-濃硫酸(Mandelin)試劑:檢查生物堿.
1%>酸納的濃硫酸溶液.與多種生物堿呈不同顏色.
(11)碘－碘化鉀(Wagner)試劑:檢查生物堿.
1克碘及10克碘化鉀,溶于50毫升水中,加熱,加2毫升醋酸,再用水稀釋至100毫升.
可作紙層板顯色劑,液可作沉淀試劑.
酚類,鞣質
(12)三氯化鐵:檢查酚類及??酸.
噴灑劑:1~5%三氯化鐵的水溶液或乙醇溶液.并加鹽酸少許.??酸呈紅色斑點,酚類稱藍色或綠色斑點.
(13)鐵氰化鉀-三氯化鉀:檢查酚類,芳香胺類及還原性物質.
噴灑劑: 1%鐵氰化鉀水溶液,2%三氯化鐵水溶液.臨用前等體積混合.
噴灑后處理: 噴灑后酚性物質呈藍色斑點.再噴2N鹽酸,能使顏色加深,紙譜可用烯鹽酸洗去噴灑液.
(14) 4-胺基安替比林-鐵氰化鉀(Emerson反應): 檢查酚類.
噴灑劑: I . 2%4-氨基安替比林乙醇溶液;
II. 8%鐵氰化鉀水溶液.
或用0.9%4-氨基安替比林和5.4%鐵氰化鉀水溶液
方法: 先噴灑I,再噴灑II,即顯色,或再放入密閉缸中,缸內放25%氫氧化銨,即產生橙色至深紅色.
(15) 對氨基苯磺酸,重氮鹽(Pauly試劑): 檢查酚類,芳香胺類及能偶合的雜環化合物.
噴灑劑: 4.5克對氨基苯磺酸,加熱溶于45毫升12N鹽酸中,用水稀釋至500毫升,取10毫升稀釋液用冰冷卻,加10毫升冷4.5%亞硝酸鈉水溶液,0℃放15分鐘(此試劑于0℃可保存3天),用前加等體積1%碳酸鈉水溶液.
一般重氮化試劑,也可用聯苯胺,對硝基苯胺等.
(16) 對甲苯磺酸: 檢查甾體,黃酮,鞣質.
噴灑劑: 20%對甲苯磺酸氯仿溶液.
噴灑后處理: 100℃加熱數分鐘,紫外線分析燈下檢查熒光斑點.
含氧雜環及蒽醌類*
(17) 三氯化鋁: 檢查黃酮體.
噴灑1%三氯化鋁乙醇液于紫外線熒光分析燈下檢示,呈黃色熒光
(18)堿式醋酸鉛: 檢查黃酮體.
噴灑劑: 飽和堿式醋酸鉛(或飽和醋酸鉛)水溶液.
于紫外線熒光分析燈下檢查熒光斑點.
(19)醋酸鎂: 檢查蒽醌甙,甙元及黃酮體
噴灑劑: 0.5%醋酸鎂甲醇溶液
方法: 90℃加熱5分鐘,呈紅色至紫色斑點.
(20)氫氧化鉀: 檢查香豆素,蒽醌甙及甙元
噴灑劑: 5~10%氫氧化鉀的甲醇溶液.
于日光及紫外線熒光分析燈下檢示斑點.
萜類,甾體
(21) 三氯化銻(Carr-Price試劑): 檢查甾體,萜類,皂類.
噴灑劑: 25克三氯化銻溶于75克氯仿中(亦可以用氯仿或四氯化碳的飽和溶液).
噴灑后處理: 100℃加熱5分鐘,于紫外線熒光分析燈下檢示熒光.
(22) 五氯化銻: 檢查甾體,萜類,皂甙.
噴灑劑: 五氯化銻-氯仿或四氯化碳(1:4),用前新鮮配制.
噴灑后處理: 120℃加熱至斑點出現,并于紫外線熒光分析燈下檢示.
(23)香蘭醛-硫酸: 檢查高級醇類,酚類,甾體,萜類,芳香油.
噴灑劑: 1克香蘭素溶于100毫升濃硫酸,或0.5克香蘭醛溶于100毫升硫酸-乙醇(4:1)中.
噴灑后處理: 室溫或120℃加熱觀察顯色斑點.
(24) 4-二甲氨基苯甲醛,醋酸,磷酸(E.P.試劑): 檢查? Azulene 及?前體 Proazulene.
噴灑劑: 0.25克4-二甲氨基苯甲醛,溶于50毫升醋酸5克85％磷酸和20毫升水的混合液中(棕色瓶中保存數月)
?:烴室溫即成藍紫色斑點,>前體于80℃加熱10分鐘出現藍紫色斑點.
(25) 氯胺T－三氯醋酸: 檢查強心甙.
噴灑劑: I. 3%氯仿T水溶液新鮮制備.
II. 25%三氯醋酸乙醇溶液(能保存數天).
10毫升I加40毫升II,用前混合.
噴灑后處理: 110℃加熱7分鐘,紫外線熒光分析燈下檢示呈藍色或黃色熒光
(26) 亞硝酸基鐵氰化鈉-氫氧化鈉(Legal試劑): 檢查不飽和內酯;甲基酮或活性次甲基,常用于強心甙
噴灑劑: 1克亞硝基鐵氰化鈉溶于100毫升2N氫氧化鈉-乙醇(1:1)的水溶液.
