中國藥典2020版三部三部通則0704

氮測定法

　　本法系依據含氮有機物經硫酸消化后，生成的硫酸銨被氫氧化鈉分解釋放出氨，后者借水蒸氣被蒸餾入硼酸液中生成硼酸銨，最后用強酸滴定，依據強酸消耗量可計算出供試品的氮含量。
　　第一法（常量法）  取供試品適量（相當于含氮量25～30mg），精密稱定，供試品如為固體或半固體，可用濾紙稱取，并連同濾紙置干燥的500ml凱氏燒瓶中；然后依次加入硫酸鉀（或無水硫酸鈉）10g和硫酸銅粉末0.5g，再沿瓶壁緩緩加硫酸20ml；在凱氏燒瓶口放一小漏斗并使凱氏燒瓶成45°斜置，用直火緩緩加熱，使溶液的溫度保持在沸點以下，等泡沸停止，強熱至沸騰，俟溶液成澄明的綠色后，除另有規定外，繼續加熱30分鐘，放冷。沿瓶壁緩緩加水250ml，振搖使混合，放冷后，加40%氫氧化鈉溶液75ml，注意使沿瓶壁流至瓶底，自成一液層，加鋅粒數粒，用氮氣球將凱氏燒瓶與冷凝管連接；另取2%硼酸溶液50ml，置500ml錐形瓶中，加甲基紅-溴甲酚綠混合指示液10滴；將冷凝管的下端插入硼酸溶液的液面下，輕輕擺動凱氏燒瓶，使溶液混合均勻，加熱蒸餾，至接收液的總體積約為250ml時，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣沖洗約1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾；餾出液用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定至溶液由藍綠色變為灰紫色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml硫酸滴定液（0.05mol/L）相當于1.401mg的N。
　　第二法（半微量法） 蒸餾裝置如圖。圖中A為1000ml圓底燒瓶，B為安全瓶，C為連有氮氣球的蒸餾器，D為漏斗，E為直形冷凝管，F為100ml錐形瓶，G、H為橡皮管夾。
　　連接蒸餾裝置，A瓶中加水適量與甲基紅指示液數滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石數粒，從D漏斗加水約50ml，關閉G夾，開放冷凝水，煮沸A瓶中的水，當蒸氣從冷凝管尖端冷凝而出時，移去火源，關H夾，使C瓶中的水反抽到B瓶，開G夾，放出B瓶中的水，關B瓶及G夾，將冷凝管尖端插入約50ml水中，使水自冷凝管尖端反抽至C瓶，再抽至B瓶，如上法放去。如此將儀器內部洗滌2～3次。
　　

　　取供試品適量（相當于含氮量1.0～2.0mg），精密稱定，置干燥的30～50ml凱氏燒瓶中，加硫酸鉀（或無水硫酸鈉）0.3g與30%硫酸銅溶液5滴，再沿瓶壁滴加硫酸2.0ml；在凱氏燒瓶口放一小漏斗，并使燒瓶成45°斜置，用小火緩緩加熱使溶液保持在沸點以下，等泡沸停止，逐步加大火力，沸騰至溶液成澄明的綠色后，除另有規定外，繼續加熱10分鐘，放冷，加水2ml。
　　取2%硼酸溶液10ml，置100ml錐形瓶中，加甲基紅-溴甲酚綠混合指示液5滴，將冷凝管尖端插入液面下。然后，將凱氏燒瓶中內容物經由D漏斗轉入C蒸餾瓶中，用水少量淋洗凱氏燒瓶及漏斗數次，再加入40%氫氧化鈉溶液10ml，用少量水再洗漏斗數次，關G夾，加熱A瓶進行蒸氣蒸餾，至硼酸液開始由酒紅色變為藍綠色時起，繼續蒸餾約10分鐘后，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣繼續沖洗約1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸餾。
　　餾出液用硫酸滴定液（0.005mol/L）滴定至溶液由藍綠色變為灰紫色，并將滴定的結果用空白（空白和供試品所得餾岀液的容積應基本相同，70～75ml）試驗校正。每1ml硫酸滴定液（0.005mol/L）相當于0.1401mg的N。
　　取用的供試品如在0.1g以上時，應適當增加硫酸的用量，使消解作用完全，并相應地增加40%氫氧化鈉溶液的用量。
　　【附注】

       （1）蒸餾前應蒸洗蒸餾器15分鐘以上。
　�。�2）硫酸滴定液（0.005mol/L）的配制　 精密量取硫酸滴定液(0.05mo/L）100ml，置于1000ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。
　　第三法（定氮儀法） 本法適用于常量及半微量法測定含氮化合物中氮的含量。
　　半自動定氮儀由消化儀和自動蒸餾儀組成；全自動定氮儀由消化儀、自動蒸餾儀和滴定儀組成。
　　據供試品的含氮量參考常量法（第一法）或半微量法（第二法）稱取樣品置消化管中，依次加入適量硫酸鉀、硫酸銅和硫酸，將消化管放入消化儀中，按照儀器說明書的方法開始消解[通常為150℃，5分鐘（去除水分）；350℃，5分鐘（接近硫酸沸點）；400℃，60～80分鐘]至溶液成澄明的綠色，再繼續消化10分鐘，取出，冷卻。
　　將配制好的堿液、吸收液和適宜的滴定液分別置自動蒸餾儀相應的瓶中，按照儀器說明書的要求將已冷卻的消化管裝入正確位置，關上安全門，連接水源，設定好加入試劑的量、時間、清洗條件及其他儀器參數等，如為全自動定氮儀，即開始自動蒸餾和滴定。如為半自動定氮儀。則取餾出液照第一法或第二法滴定，測定氮的含量。